CRISPR/Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专题研讨（7.23-24 网络研讨）

的都由

1.3、CRISPR/Cas子系统的工作规则

2、CRISPR/Cas9子系统的设计的的发展及其归纳规则

2.1、CRISPR/Cas9子系统的设计的建立

2.2、CRISPR/Cas9子系统的设计的归纳规则

2.3、CRISPR/Cas9子系统的设计的脱靶关键问题

三、Cas蛋白质的并不必须

1、Cas蛋白质的并不必须

1.1、Cas蛋白质的分类

1.2、三种归纳规则最相当多的Cas蛋白质

1.3、Cas9蛋白质的骨架不同之处简介

1.4、Cas9蛋白质与PAM序列

1.5、Cas9的多肽链简化与NLS

1.6、如何并不必须Cas蛋白质？

2、Cas蛋白质资源查询

3、以上内容可子系统性实验者的概要、实验者长处、实验者结果介绍

第一天下午13:30-17:00

四、CRISPR（gRNA）的的设计与混合物

1、的设计gRNA以前必须确切的事（总编辑策略的并不必须、等位基因骨架归纳及查询规则）

2、RNA的的设计（的网站互动的设计演练）

3、gRNA表述核酸的紧密结合

3.1、gRNA的体内表述（RNP）

3.2、gRNA细胞可能会表述核酸紧密结合

3.3、常见gRNA/Cas蛋白质表述核酸

4、以上内容可子系统性实验者的概要、实验者长处、实验者结果介绍

五、gRNA活性测定

1、 Indel突变测定的基本策略

1.1、错配内切酶规（EMC）

1.2、TIDE/ICE归纳规

1.3、TA他的团队规

1.4、酶切片段长度多态性规（RFLP）

1.5、其他规则

2、基于胚胎的活性有效性规则

3、以上内容可子系统性实验者的概要、实验者长处、实验者protocol、实验者结果介绍

六、等位基因总编辑机器Cas12a(Cpf1)

1、Cpf1的辨认出

2、Cpf1与Cas9的区别

3、Cpf1的归纳规则与此相关

4、Cpf1可同时介导多个等位基因的总编辑

第二天清晨8:30-11:30

七、透过CRISPR/Cas9子系统的设计创设等位遗传物质总编辑细胞可能会系

1、前提等位基因的等位遗传物质都由归纳

1.1 前提等位基因在目的细胞可能会中所的表述持续性

1.2 如何确切等位基因的关键的系统域

1.3 星型剪接及多磷酸化本

2、等位遗传物质总编辑策略的设计

2.1等位基因敲除

2.2等位基因敲入

2.3驻点突变

2.4邻近地区段删除

3、sgRNA的的设计与活性有效性

3.1 如何并不必须位置有用的gRNA？

4、运用于等位基因敲入的酪氨酸DNA的的设计

4.1 Donor DNA的范例

4.2 运用于ssODN作为Donor

4.3 的设计ssODN的通则

4.4 插进核苷酸与DSB核苷酸一致的持续性

4.5 插进核苷酸与DSB核苷酸不一致的持续性

5、原核生物（和/或酪氨酸）整合细胞可能会系的规则（脂质体转染，电转，病毒转导）

6、阳性他的团队配对

6.1 抗生素配对（Protocol）

6.2 挑单细胞可能会他的团队（Protocol）

6.3 等位性状确认

6.4根据标靶高效率估算必须配对的他的团队生产量

6.5 有限稀释规稀释细胞可能会的流程（Protocol）

6.6 等位性状确认

7、等位遗传物质总编辑细胞可能会系的建立

8、增加等位基因敲入（同源重组）高效率的策略

9、以上内容可子系统性实验者的概要、实验者长处、实验者protocol、实验者结果介绍

八、CRISPR/Cas子系统介导的等位基因总编辑与此相关详述

1、CRISPR常规工作流程

2、Knock-out与此相关1

3、Knock-out与此相关2

4、Knock-in与此相关

第二天下午13:30-17:00

九、透过CRISPR子系统的设计创设等位遗传物质总编辑两栖动物

1、CRISPR/Cas规则与基本上规则的比较

2、等位基因总编辑两栖动物混合物流程

3、通过电子显微镜注射规混合物等位基因总编辑大鼠

3.1、大鼠的超排和电子显微镜注射

3.2、胚胎移植和等位性状确认

3.3、电子显微镜注射规授予的等位基因总编辑两栖动物的确认

4、通过胚胎可能会他的团队规混合物等位基因总编辑两栖动物

4.1、供胚胎可能会分离出来、培育出

4.2、供胚胎可能会的等位基因总编辑

4.3、胚胎可能会核移植操控

4.4、胚胎移植

4.5、等位基因总编辑个体的确认和扩繁

十、CRISPR磷酸化选择性/磷酸化激活以及CRISPRscreen

1、dCas9的特征简介

2、运用CRISPR子系统的设计顺利完成磷酸化选择性的规则

3、CRISPR磷酸化选择性/磷酸化激活子系统的设计及简化

4、CRISPRoff

5、CRISPR screen及CRISPRa/iscreen（高通量配对）

十一、单序列总编辑与单序列总GUI（CBE、ABE、PE）

1、 单序列总GUI的规则

2、 单序列总GUI的简化

3、 作准备总编辑子系统的设计规则及其归纳规则

十二、等位基因总编辑子系统的设计的脱靶关键问题

1、 脱靶造成了的因素

2、 等位基因总编辑机器的脱靶风险

3、 脱靶测定规则

4、 如何下降脱靶？

十三、Cas12和Cas13蛋白质及其归纳规则

1、 Cas12和Cas13与Cas9的关联性

2、 Cas13不同之处及其在核酸测定中所的归纳规则

3、 SHERLOCK及DETECTR子系统规则

十四、等位基因总编辑子系统的设计子系统性资源

详述CRISPR/Cas子系统以及等位基因总编辑子系统性的原核生物、gRNA、角川书店、细胞可能会、Protocol以及子系统的设计blog等资源。

可能秘书处电子邮件

时长地点：

2022/7/23-24

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CRISPR/Cas9等位基因总编辑与其他两天的可能抵远超报6000元

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